一、小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA检测试剂盒技术指导规格参数
中文名称:小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA检测试剂盒技术指导
规格:48T 96T
种属:小鼠
品牌:臻科生物
检测波长:450nm
所需样本体积:保险量50ul
适用范围:仅供科研,不得用于临床诊断,临床的标本做课题是可以用的。
检测目的:用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)的含量。
检测样本种类:血清,血浆,尿液,组织匀浆,细胞上清液,脑脊液,灌洗液,粪便等样本.
臻科供应属种有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、人子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物、鱼、昆虫ELISA试剂盒等
二、ELISA试剂盒组成
试剂盒组成 | 48 孔配置 | 96 孔配置 | 保存 |
说明书 | 1 份 | 1 份 |
|
封板膜 | 2 片(48) | 2 片(96) |
|
密封袋 | 1个 | 1个 |
|
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
标准品 | 0.5ml×1 瓶 | 0.5ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 | 1.5ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 | 2-8℃保存 |
显色剂A 液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B 液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
20 倍浓缩洗涤液 | 20ml×1 瓶 | 30ml×1 瓶 | 2-8℃保存 |
三、样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心
20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分
钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待
检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
四、注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
五、ELISA试剂盒计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
六、ELISA试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.990 以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
3.保存条件及有效期:2-8℃冷藏,试剂盒保质期6个月。
七、更多优势产品
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