大鼠促黄体激素（LH）ELISA试剂盒的操作步骤详细介绍
发布时间：2023-01-18 点击量：4432
大鼠促黄体激素（LH）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
大鼠促黄体激素（LH）ELISA试剂盒的操作步骤：
1、标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品；。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、加酶：每孔加入酶标试剂，空白孔除外。
4、温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5、配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
7、显色：每孔先加入显色剂，再加入显色剂，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
8、终止：每孔加终止液，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9、测定：以空白孔调零，依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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