鱼胰岛素样生长因子1（IGF-1）ELISA试剂盒的实验原理和操作注意事项

　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼胰岛素样生长因子1（IGF-1）水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素样生长因子1（IGF-1），再与HRP标记的胰岛素样生长因子1（IGF-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。

 

　　TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素样生长因子1（IGF-1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼胰岛素样生长因子1（IGF-1）浓度。

 

　　试剂盒样品的采集和存储：

　　血清-使用血清分离管，使样品在室温下或凝块一夜之间两个小时在大约1000×4oCG。测定新鲜制备的血清离心20分钟立即或存放样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免反复冻融循环。

 

　　血浆采集血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂。15分钟，离心样品×G在2到8摄氏度范围内采集30分钟。去除血浆和即刻检测或者储存样品。

 

　　鱼胰岛素样生长因子1（IGF-1）ELISA试剂盒的操作注意事项：

　　(1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

 

　　(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以兔变质。

 

　　(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剤不要混用。保质前使用。

 

　　(4)使用一次性的吸头以兔交又污染,吸取終止液和底物A、B液时,造兔使用带金部分的加样器。

 

　　(5)使用干净的望料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的种成份及样品。

 

　　(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。