马布特罗ELISA试剂盒的反应原理及检测步骤
发布时间：2020-08-25 点击量：615
马布特罗ELISA试剂盒是用于饲料、组织（肉/肝/肾）、牛奶、血清、血浆和尿样中马布特罗残留的定量检测。基于竞争性酶联反应原理，含有马布特罗的药物抗原已经包被于微孔板上，在分析时，样品中药物特异性地与一抗相结合。如果药品中有药物存在，它将阻止包被于微孔板上的药物与一抗结合。当与样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后，只剩下与微孔内药物相结合的抗体，与经酶标记的二抗相结合。反应后颜色深度与样品中马布特罗的含量成反比。
马布特罗ELISA试剂盒的检测步骤：
仔细的洗涤非常重要。避免在操作过程中微孔出现干燥。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上。
2、准备：取出需要数量的微孔板，将用剩的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。将微孔板条插入微孔架，标准品和样品做两个平行实验，记录下标准品和样品的位置。
3、加抗体：每孔加入100μL抗体溶液，37℃恒温箱孵育30分钟。
4、洗板：倒出孔中的液体，将微孔架倒置在干净吸水纸上拍打，以保证*除去孔中的液体。每孔加满稀释后的洗涤工作液，静置20秒钟，甩去液体，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。
5、加标准品/样品：加入50μL标准品或处理好的样品到各自的微孔中，标准品和样品做两个平行实验，然后加入50μL酶标记物到微孔，小心地充分混合，37℃恒温箱孵育30分钟。
6、重复3的操作。
7、显色：每孔先加入底物液A50μL，再加入底物液B50μL，37℃避光孵育15min（如果显色过浅，可适当延长孵育时间，反之亦然）。
8、测定：每孔加入终止液50μL，设定酶标仪于450nm处，测定每孔OD值。
